- 產品
- 供應
- 公司
- 新聞
|
|
||||||||||||||||||||||||||||
食用油中苯并（a）芘（BaP）ELISA檢測試劑盒使用說明書
?
檢測限：1.5μg/kg?定量區間：2-20μg/kg
?
本產品可以采用單點定標，即點1個標準品實現定量分析，最大可實現47個樣本的檢測。采用單點定標時，數據分析請來電索取專門的Excel數據分析軟件
?
1.?樣本前處理（動植物性食用油脂，如菜籽油、大豆油、花生油、玉米油、調和油等）
|
需要但未提供的試劑和器皿如下： |
|
(1)?二氯甲烷，分析純 |
|
(2)?正己烷，分析純 |
|
(3)?甲醇，分析純 |
|
(4)?去離子水 ????????? |
|
(5)?5mL圓底或錐底玻璃離心管 |
|
(6)?2ml玻璃進樣瓶或者5ml圓底玻璃試管（一次性） |
|
(7)?5mL有機玻璃離心管架（24孔），1個 |
|
(8)?17*17*10cm瓷盤，1個 |
|
? |
|
試劑配制 |
|
預處理試劑：取1管試劑A，加入到1瓶試劑B中，劇烈震蕩使其完全溶解，備用【配制好的預處理試劑呈白色半透明狀，于2-8℃保存有效期10天】 |
|
? |
|
1.1預處理 |
|
1）稱取0.4±0.005g油樣于5mL玻璃離心管中，加入0.4mL?預處理試劑混勻； |
|
2）室溫靜置5min（離心管斜躺在桌面上） |
|
3）加入0.4mL去離子水、1mL正己烷劇烈振蕩2min；靜置分層約1min（此時可以先活化柱子） |
|
1.2過SPE柱 |
|
1）活化：依次采用1mL二氯甲烷、1mL正己烷過柱 |
|
|
|
3）淋洗：依次用1mL正己烷、1mL試劑C淋洗，最后吹空氣3s； |
|
4）解吸：加入1mL二氯甲烷解吸（流速1mL/min），收集全部解吸液于2mL玻璃進樣瓶中 |
|
5）濃縮及復溶：40℃水浴氮吹干；加入1mL甲醇渦旋15s；取0.1mL甲醇復溶液，再加入 |
|
0.1mL樣本稀釋液渦旋15s |
2.?操作步驟
|
實驗前，請將檢測試劑盒從2-8℃冰箱中取出，于室內溫度20-28℃下平衡1小時！ |
|
1）取出平衡后的適量板條，其余放回鋁膜袋中； |
|
2）依次：加50μL標準品/樣本于相應微孔中；加50μL酶結合物和50μL抗體至所有微孔； |
|
3）蓋上板貼，于20-28℃下，孵育20分鐘；倒出微孔中液體； |
|
4）將洗滌液注滿微孔浸泡15s倒出，重復2次； |
|
5）加100μL底物至微孔中，于20-28℃下，孵育10分鐘； |
|
6）加100μL終止液至微孔中，于450/630nm波長下，讀數 |
?
3.?結果分析
|
1）結合率計算公式 |
|
|
|
其中， ?????????????????????????????B：為i樣本或濃度點的結合率； |
|
?????????????????????????????Ai：為i樣本或濃度點的吸光度； |
|
?????????????????????????????A0：為零標準孔的吸光度； |
|
2）建立標準曲線：以標準品濃度的對數為x軸，以其對應的結合率B的logit值為y軸，進行線性擬合 |
|
建立標準曲線。將樣本結合率（計算見1）中公式）代入曲線方程，即可求出樣本中苯并（α）芘的含量。 |
|
3）超出檢測上限的樣本稀釋方法 |
|
①?將樣本前處理步驟“1.2過SPE柱-5）”中0.1mL甲醇復溶液用無水甲醇稀釋5倍； |
|
②?將①的溶液，參照說明書采用樣稀稀釋后點樣； |
|
③?將得出的含量再乘以5，即為最終樣本中苯并（α）芘的含量； |
?
4.?注意事項、常見問題分析及解決辦法
|
1）注意事項 |
|
n?不同產品、不同批次之間試劑不得混用； |
|
n?吸取不同試劑，要更換吸頭，以免造成試劑污染； |
|
n?底物變為藍色，表示已污染變質或過期，不得使用； |
|
n?終止液中含鹽酸，使用時防止接觸皮膚，如不小心濺到，及時用大量流水沖洗，嚴 |
|
重時請及時就醫； |
|
n?苯并（α）芘為致癌物，使用標準品、陽性樣本，須在通風櫥內進行操作，并 |
|
穿長袖實驗服，戴手套和口罩； |
